柱孢藻毒素检测试剂盒-美国ABRaxis；ELISA 试剂盒用户操作指南【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！齐一生物： ；

柱孢藻毒素检测试剂盒-美国ABRaxis试剂盒特点 
1.AP单克隆抗体特异地与AP结合，和其它结构相类似的化学物质不发生交叉反应。单克隆抗体质量稳定每批次见几乎没有变化。
2.检测范围5μg/L - 500μg/L (ppb) 。通过固相萃取浓缩可以检测更低的浓度。
3.这个试剂盒有很高的重复性，变异系数在10%之内。
4.操作简单，整个过程仅花费2.5小时
5.试剂盒的形式是96孔微孔板，可以同时检测多个样品，花费合理。
检测原理 （竞争ELISA）
1. 竞争性反应 
这个检测方法依靠单克隆抗体来识别AP。样品中的AP和一个AP-酶结合物预先混合然后加入到每个微孔中竞争包被在微孔表面的特异性抗体。样品中AP的浓度如果高于AP-酶结合物，AP将主要与抗体结合。反之样品中AP的浓度如果低于于AP-酶结合物，AP-酶结合物将主要与抗体结合。
2. 显色反应 
通过洗涤步骤去除没有反应的AP和过多的AP-酶结合物。通过加入底物来检测AP。和微孔板中抗体结合的AP-酶结合物催化底物发生反应产生有色物质。通过一个孵育期用稀酸终止反应。样品中AP的浓度越高导致结合到微孔板抗体上的AP-酶结合物越少，从而产生的颜色越淡，吸光度越低。
3. 定量分析 
利用已知浓度的AP标准的浓度和在450nm条件下获得的吸光度值做出一条剂量反应曲线（标准曲线）。把样品的吸光度值用内插法插入到标准曲线中可以精确的计算出样品中AP的浓度。
AP 检测流程
1.样品处理
在操作前半小时从冰箱中拿出试剂盒使其恢复到室温（18-25°C）。过滤样品，加入甲醇和DMSO使甲醇的zui终浓度为10% (v/v),DMSO的zui终浓度为1%(v/v)。对于一些样品进行固相萃取是必要的。
2. 标准溶液
利用甲醇溶液（甲醇：水 0.8：8.2）把AP标准浓缩液稀释10倍。然后对此溶液进一步稀释成设定的AP标准的浓度（5μg/L- 500μg/L）。在配制的时候先加甲醇溶液后加标准。
3. 抗原-酶结合物溶液
重新配制一瓶抗原-酶结合物溶液：抗原-酶结合物粉末(#3) + 缓冲液(#4, 白盖).
4. 标准/样品 与结合物混合
在没有包被的微孔板中(#8)混合100μL AP标准（或样品）和100μL酶结合物溶液。先加结合物后加标准或样品。
5. 竞争反应
在包被抗体的微孔板(#1)的每个孔中加入100μL在第四步中混合的溶液，在室温(18-25°C)孵育60分钟。
6. 洗液
用蒸馏水以1：5的比例稀释洗液（6倍浓缩）：1ml 洗液(#5) + 5ml蒸馏水 
7. 没有结合的物质
每个微孔用300μL的洗液冲洗，并重复两次。在吸水纸上用力的排板出去微孔中的液体。
8. 显色
每个微孔加入100μL显色试剂(#6, 棕色瓶)，在室温(18-25°C)孵育30分钟。然后加入每孔再100μL的终止液(#7, 黑盖)终止反应。
10. 定量
在450nm测定每个标准的吸光度值制作标准曲线。利用内插法把样品的吸光度值代入标准曲线计算样品中AP的含量。

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