植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量-单线态氧气比色法方法学
时间:2020-09-14 阅读:1962
植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂是一种旨在通过二甲基-4-亚硝基苯胺,受到单线态氧气-的作用,出现去色现象,由分光光度仪比色分析,定量检测植物组织细胞内单线态氧气活性氧族的生成和增加的经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种新鲜的植物组织(叶片、谷粒、种子等),以及叶绿体等细胞器的单线态氧气检测。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HClO)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡。其中单线态氧气(singlet oxygen;1 O2)是分子氧(O2)的抗磁形式或电激发形式。通过染料分子,例如孟加拉红(Rose Bengal)、亚甲基兰(Methylene Blue)、卟啉类化合物(Porphyrins)染料的光敏过程中能量转移产生,或过氧化氢和次氯酸的化学反应产生。单线态氧气可以调节紫外线A辐射的生物学作用、激活各种细胞信号通路等。单线态氧气会导致植物的光动力损伤(photodynamic damage)和动物心血管问题。基于二甲基-4-亚硝基苯胺(N,N-Dimethyl-p-nitrosoaniline;PNDA或RNO)作为单线态氧气的选择性受体,在单线态氧气的存在下,产生去色作用,在分光光度仪下(440nm波长),呈现吸光峰值的降低。据此定量检测植物组织细胞内单线态氧气活性氧族的浓度。
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