LIF human 白血病抑制因子(重组人)
时间:2014-12-17 阅读:2466
产品名称:LIF human 白血病抑制因子(人),Leukemia inhibitory factor,重组人白血病抑制因子
产品说明:白血病抑制因子是一种多效的淋巴因子,属于细胞因子中白细胞介素6家族。它zui初被描述为髓系白血病细胞增殖的抑制因子和髓系白血病细胞分化为巨噬细胞的诱导因子。LIF的其他活性包括抑制脂肪形成和在胆碱能神经元的分化、造血作用、炎症反应、骨代谢有重要作用。LIF能抑制胚胎干细胞的分化,因此在ES细胞培养中有非常重要的作用。人和小鼠LIF在氨基酸水平上有78%同源性。人源的LIF对小鼠和人细胞具有相同的活性,但是鼠科动物的LIF对人细胞不具有活性。
货号:01-A0880
批号:01-1-88-8127
产品规格:10µg, 100µg, 1000µg
来源:ISOkine™重组人白血病抑制因子是来源于大麦胚乳细胞(Hordeum vulgare)。
形式:经过0.2µm滤膜滤灭,从PBS中冻干,pH 7.2。
纯度:经SDS-PAGE凝胶电泳分析,纯度大于98%。
溶解:注意: 打开瓶盖前先用离心机离心。建议在无菌水溶解冻干粉状重组蛋白质,终浓度不小于100 µg/ml。长期存储建议添加一个载体蛋白(0.1% HSA或BSA)。
稳定性:冻干粉蛋白质,虽然在室温下能稳定保存几周,但储存在-20°C。分装的量以一次实验用完为好并立即放于-20°C,或立即将重组蛋白放于-20°C。避免反复冻融循环。
生物活性:每批ISOkine™生长因子都进行生物活性测试,并已证实与其他商业来源的生长因子有类似的生物活性,ISOkine™人LIF的生物活性是在一定剂量依赖下通过诱导TF-1细胞增殖的能力来决定的。对应于比活性> 2.5 x 10 e6 U / mg来说,这种效应的ED50值通常是低于0.4 ng / ml。对具体的应用和细胞系应确定*浓度。
内毒素水平:ISOkine™系列产品内毒素水平都低于0.005ng/µg (< 0.05EU/µg).
MAT分析:纯化的ISOkine™系列产品不携带有致热的或促炎污染物,因为用人10-plex细胞因子结合单核细胞活化测试分析检测IL-6, TNF-alpha 和IL-1beta的诱导. Ref. The Blood Bank, University Hospital of Iceland, Reykjavik, Iceland。
分子量: 重组人LIF包含180个氨基酸和一个长度为16个氨基酸的组氨酸标签,总氨基酸数为196个。预计分子量为21.8KDa。由于糖基化,重组蛋白在SDS-PAGE电泳下迁移显示分子量大小为25-30 kDa。
白血病抑制因子(人)简介
1.LIF的产生
已在活化的T细胞、单核细胞、神经胶质细胞、肝成纤维细胞、骨髓基质细胞、胚胎干细胞、胸腺上皮细胞等多种细胞中发现有LIF的表达。
2.LIF的分子结构和基因
人的LIF基因定位于第22号染色体,基因长度分别为6.0kb,含有3个外显子和2个内含子,基因编码区域具有高度的保守序列。LIF为180个氨基酸,核心蛋白分子量为20kDa,有7个糖基化位点,6个Cys,分子内部二硫键对于维持LIF分子的结构和生物学活性可能起重要作用。由于糖基化程度的不同,LIF分子量和电荷有所差别,分子量38~64kDa,IP8.6~9.2。LIF体外生物学功能似乎与糖基化程度无关,但糖基化是否影响LIF在体内稳定性和功能尚待确定。在氨基酸水平上,LIF与抑瘤素-M(oncostatin M,OSM)和睫状神经营养因子(CNTF)有一事实上的同源性,而且在蛋白质分子二级结构上也有相似之处。
3.LIF的受体
ILF受体α链为低亲和力受体,其结构属于红细胞生成素受体家族成员,含有2个该家族特征性结构域。gp130是LIF受体的另一个亚单位,与LIF受体α链共同组成高亲和力受体。LIF受体分布较广泛,如脂肪细胞、成骨细胞、神经细胞、胚胎癌细胞、胚胎干细胞、M1白血病细胞以及活化的巨噬细胞等。
4.LIF的生物学活性
(1)调节细胞的增殖、分化和表型:LIF抑制小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的分化。对于造血系统中的肿瘤细胞,LIF常显示出抑制效应,同时诱导这些肿瘤细胞的分化,例如LIF可抑制小鼠白血病M1细胞的增殖,诱导其转变为巨噬细胞表型,如表达Fc受体,并获得吞噬能力等。对单核细胞的分化也超诱导作用。LIF与GM-CSF、G-CSF或IL-6协同抑制HL-60和U937细胞的生长,并诱导其分化。LIF增强IL-3对巨核细胞前体的造血干细胞的致有丝分裂作用,提高体内巨核细胞和血小板的数量。LIF还可促进成肌细胞的增殖。在一定条件下,LIF可促进新生大鼠背根神经节中的神经元表型从肾上腺素能型转变为胆碱能型,因此LIF又称为胆碱能神经元分化因子(cholinergic neuronal differentia-tion factor,CNF)。此外,LIF还可促进移植神经嵴分化的胚胎性神经元的存活。
(2)抑制脂蛋白脂酶活性,降低3T3-L1脂肪细胞对游离脂肪酸的摄取。
(3)促进骨的重吸收,这种作用可能是通过LIF刺激成骨细胞合成前列腺素所介导的。
(4)诱导肝脏急性期蛋白的产生。
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