脂多糖提取试剂盒使用中的常见问题问答
时间:2014-12-17 阅读:733
脂多糖提取试剂盒(LPS Extracton Kit)
货号:17141
名称:LPS Extraction Kit 脂多糖提取试剂盒
产地:韩国iNtRON
规格:100T
LPS背景描述:
脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,结构很复杂、热稳定性*(在250℃下干热灭菌2h才*灭活)。受LPS发现的历史原因,如今LPS的概念几乎等同于内毒素(endotoxin)。LPS由多糖链和脂质A组成,不同细菌间的多糖链是高度变化的,决定细菌的血清型;而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。
正是LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤,
技术参数:
从不同的细菌中提取脂多糖的量,如下表所示:
利用脂多糖提取试剂盒从不同的OD600nm的革兰氏阴性菌中提取LPS,并采用Purpal Assay 定量分析LPS提取量,提取效率列于上表中。同时利用SMARTTM Micro BAS 分析试剂盒分析蛋白的含量,结果显示蛋白质的含量低于0.2微克。
试剂盒使用中常见问题问答:
Q:我打算提取脂多糖,但是我们的离心机针对15ml的离心管zui大的转速是10,000rpm。但按照说明书中描述,需要13,000rpm离心10分钟。想请问我采用10,000rpm下离心30分钟能达到同样的效果吗?
A:可以的,您可以在10,000rpm下离心20-30分钟,但是我们建议为了达到的效果采用13,000rpm离心10分钟。
Q:我想要提取脂多糖,我能先使用试用装吗?
A:脂多糖提取试剂盒是基于酚-水提取法研发的,因此是使用效果好且操作简单,我们没有提供试用装。
Q:我想在植物中通过分离多糖来核对其免疫活性,我想知道多糖中是否含有脂多糖。
A:在植物中没有脂多糖。脂多糖存在于细菌中二各种糖类是存在于植物中。如果您想确认提取的LPS,可使用银染法。换句话说,在您使用LPS提取试剂盒提取LPS后,您可以利用银染法简单地分析LPS的带形。
Q:我一直在使用LPS提取试剂盒,但是产物中还存在少量蛋白。
A:存在较多的蛋白质意味着上样量太大了,为了得到更好的效果使用建议的样品用量,如果提取的LPS中存在蛋白,建议使用蛋白酶k来去除。
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