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鱼促卵泡素(FSH)酶联免疫分析

时间:2013-11-12      阅读:1462

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:                                                         96T

1U/L -32U/L

 

使用目的:

本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中促卵泡素(FSH)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼促卵泡素(FSH)水平。用纯化的鱼促卵泡素(FSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH),再与HRP标记的促卵泡素(FSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的促卵泡素(FSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鱼促卵泡素(FSH)浓度。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品(64U/L)

0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

  1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

32U/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

16U/L

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

8U/L

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

4U/L

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

2U/L

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

 

 

  1. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
  3. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  5. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  6. 温育:操作同3。
  7. 洗涤:操作同5。
  8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  10. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结:

 

计算

  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  1. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
  2. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

RC-0097R Anti-ALK/CD246Ag (Anaplastic Lymphoma Kinase)  间变型淋巴瘤激酶抗体
RC-1222R Anti-AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase)  α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体
RC-1115R Anti-AMPK alpha-1 (AMP-activated Protein Kinase-α1)  腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
RC-1116R Anti-AMPKβ1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1)  腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体
RC-0057R Anti-Amylin  糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体
RC-0076M Anti-β-Amyloid 1-42 CT(Aβ1-42)  β淀粉样肽1-42 (C端抗体)
RC-0104M Anti-β-Amyloid(1-16)  β淀粉样肽(1-16)抗体
RC-0871R Anti-β-Amyloid(31-35)  β淀粉样肽(31-35)抗体
RC-0105R Anti-β-Amyloid(1-28)  β淀粉样肽(1-28)抗体
RC-0106M Anti-β-Amyloid(1-40)  β淀粉样肽(1-40)抗体
RC-0877R Anti-β-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉样肽 1-40 C端抗体
RC-0877M Anti-β-Amyloid 1-40(CT)mouse  β淀粉样肽 1-40 C端抗体
RC-0107R Anti-β-Amyloid(1-42)  β淀粉样肽(1-42)抗体
RC-0587R Anti-Ang-Ⅱ (Angiotensin Ⅱ)  血管紧张素II抗体
RC-0438R Anti-Angiotensin II receptor (AngⅡ R)  血管紧张素Ⅱ受体抗体
RC-0800R Anti-ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1)  血管位蛋白样1/血管生成素样蛋白-1抗体
RC-0537R Anti-ANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2)  血管位蛋白样2/血管生成素样蛋白-2抗体
RC-1087R Anti-ANGPTL4/ANG-4 (Angiopoietin-like Protein 4)  血管位蛋白样4/血管生成素样蛋白-4抗体
RC-1171R Anti-Annexin A  膜粘连蛋白-A抗体
RC-0576R Anti-Annexin II  膜粘连蛋白-2抗体
RC-0398R Anti-Annexin V  膜粘连蛋白-5抗体
RC-0450R Anti-Annexin V (Recomb Humen Annexin V)  重组膜粘连蛋白-5(人)抗体
RC-1228R Anti-AP1(adaptin)  衔接蛋白1抗体
RC-0058R Anti-Apaf-1(Apoptosis protease activating factor-1)(CT)  凋亡蛋白活性因子-1抗体(C端)
RC-0059R Anti-Apaf-1(Apoptosis protease activating factor-1)(NT)  凋亡蛋白活性因子-1抗体(N端)
RC-0040R Anti-APC(Activated protein C)  APC活化蛋白C抗体
RC-1254R anti-apoD (Apolipoprotein/APOD protein )  载脂蛋白D抗体
RC-0167R Anti-Apo-E (Apolipoprotein E)  载脂蛋白E抗体
RC-0112M Anti-APP695/770(Amyloid protein precursor 695/770 )  淀粉样肽前体蛋白抗体
RC-0261R Anti-AQP-2(aquaporin Protein-2)  水通道蛋白-2抗体
RC-1253R Anti-AQP-3(aquaporin Protein-3)  水通道蛋白-3抗体
RC-0634R Anti-AQP4(aquaporin Protein-4)  水通道蛋白-4抗体
RC-0118R Anti-AR(Androgen Receptor)  雄激素受体抗体
RC-0385R Anti-ARC (ARG3.1 Activity-regulated cytoskeleton-associated protein)  ARC抗体
RC-1145R Anti-ARF6 (ADP-ribosylation factor 6)  ADP核糖基化因子6抗体
RC-0114M Anti-Aromatase P450  芳香化酶/细胞色素P450/P450抗体
RC-0804R anti-ARIP2a(Activin receptor 2A)  激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗体
RC-0857R anti-β-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2)  β-抑制蛋白1/2抗体
RC-0801R anti-ARIP2B(Activin receptor 2B)  激活素受体2B/激活素受体相互作用蛋白2b抗体
RC-0055R Anti-ART(Artemin)  胶质细胞系源性神经营养因子GDNF的一种抗体
RC-0600R Anti-ARα1(α1-adrenergic receptor)  α1肾上腺素能受体抗体
RC-1155R Anti-ASCL1/MASH1 (achaete-scute complex homolog-like protein 1)  神经母细胞特异性转移因子抗体
RC-1282R anti-ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1)  p53凋亡刺激蛋白1抗体
RC-1283R anti-ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2)  P53凋亡刺激蛋白2
RC-0045M Anti-AT/AGT(Angiotenogen)  血管紧张素原抗体
RC-0630R Anti-AT1R(Angiotensin II Type 1 Receptor)  血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体
RC-0517R Anti-ATF1 (Activating Transcription Factor1)  活化复制因子1抗体
RC-0518R Anti-ATF2 (Activating Transcription Factor2)  活化复制因子2抗体
RC-0519R Anti-ATF3 (Activating Transcription Factor3)  活化转录因子3抗体
RC-1103R Anti-B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1)  程序性死亡配体1抗体
RC-0673R Anti-B7-H4 ( V-set domain containing T cell activation inhibitor 1 )  B7H4抗体
RC-0164R Anti-BACE/ASP2   β分泌酶抗体
RC-0892R Anti-Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter)  相关死亡促进因子Bad抗体
RC-1284R anti-Bak(BCL2 homologous antagonist/killer)  Bcl-2同源拮抗剂Bak抗体
RC-0612R Anti-BADH2 (Betaine-aldehyde dehydrogenase )  BADH2抗体
RC-0275R Anti-Bassoon/RCN(zinc finger protein)  锌指蛋白231抗体
RC-0127M Anti-Bax (Bcl-2 Assaciated X protein)  Bax(小鼠来源抗体)
RC-0127R Anti-Bax(Bcl-2 Assaciated X protein)  Bax抗体
RC-0032R Anti-Bcl-2(B cell lymphoma/leukemia-2)  Bcl-2抗体
RC-0662R Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21(breast cancer resistance protein)  乳腺癌耐药相关蛋白抗体
RC-0248R Anti-BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor)  脑源神经营养因子/脑衍化神经营养因子
RC-0466R Anti-Beta-casein(β-casein)  β-酪蛋白(抗体)兔抗山羊、绵羊
RC-0814R anti-bov β-lactoglobulin(bov beta-lactoglobulin)  牛β-乳球蛋白抗体
RC-0813R anti-bov Casein  抗牛酪蛋白抗体
RC-0217R Anti-BFGF/FGF-2  碱性成纤维细胞生长因子抗体
RC-0470R Anti-BGP(Bone Gla-protein)  骨保护蛋白/骨钙素抗体
RC-1153R Anti-Bid (BH3 interacting domain death agonist)  BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体
RC-0726R Anti-BIRC5/Survivin variant  细胞凋亡抑制因子5抗体
RC-0729R Anti-BK channel (stretch-activated Kca channel)  BK通道蛋白抗体
RC-0868R Anti-BKCa channels(calcium-activated potassium channel)  钙激活钾通道蛋白抗体
RC-1012R Anti-BMP2 (bone morphogenetic protein 2)  骨形态发生蛋白-2抗体
RC-0504R Anti-BMP-7(bone morphogenetic protein-7)  骨形态发生蛋白-7抗体
RC-0044R Anti-BNP (Brain Natriuretic Peptide )  脑钠素/利钠肽抗体
RCb-0044R Anti-BNP/Biotin (Brain Natriuretic Peptide )  生物素化脑钠肽
RC-1089R Anti-BRAF  黑素瘤相关蛋白抗体
RC-0802R Anti-BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat)  乳腺癌易感基因1抗体(小鼠 大鼠)
RC-0803R Anti-BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(human)  乳腺癌易感基因1抗体(人)
RC-1210R Anti-BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2)  乳腺癌易感基因2抗体
RC-0489R Anti-BrdU (Bromodeoxyuridine)  溴脱氧尿苷抗体
RC-0489M Anti-BrdU (Bromodeoxyuridine)  溴脱氧尿苷单克隆抗体
RC-0917R Anti-BrdU (Bromodeoxyuridine)  溴脱氧尿苷抗体
RC-1015R Anti-BRMS-1 (Breast cancer metastasis-suppressor 1)  乳腺癌转移抑制基因1抗体
RC-0292R Anti-RCA  兔抗牛血清白蛋白抗体
RC-0031R Anti-BTG2/TIS21(B-cell translocation gene 2)  B细胞迁移基因2抗体
RCh-0571M Anti-BTK(Monoclonal Antibody to BTK)  鼠抗人非受体型酪氨酸激酶BTK单克隆抗体
RC-0324R Anti-C  过敏毒素C(补体C)抗体
RC-0091R Anti-CA125 (Ovarian cancer antigen)  卵巢癌抗原抗体
RC-1239R Anti-CA15-3  乳腺癌相关抗原抗体
RC-0043R Anti-CAD/CPAN(Caspase-Activated Deoxyribonuclease)  Caspase 激活的脱氧核糖核酸酶抗体
RC-0030M Anti-Calcineurin α /PP-2B alpha 1  蛋白磷酸酯酶-2B催化亚单位抗体
RC-1099R Anti-Calpain 1  钙蛋白酶抗体
RC-0095R Anti-Calponin 1  钙调节蛋白-1抗体
RC-0564R Anti-CaMK2a(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II alpha)  钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体
RC-0541R Anti-CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita)  钙/钙调素依赖蛋白激酶2b抗体
RC-1078R Anti-CAS (Cellular Apoptosis Susceptibility)  细胞凋亡敏感性基因
RC-0169R Anti-Caspase-1 (ICE/CASP-1/P45)  天冬氨酸-胱氨酸特异性蛋白酶家族抗体
RC-0092R Anti-Caspase-10  半胱胺酸蛋白酶-10抗体
RC-1105R Anti-Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体
RC-0053R Anti-Caspase-13  半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗体
RC-0081R Anti-Caspase-3/CPP32/SCA-1  半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗体
RC-0151R Anti-Caspase-6 (CT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(C端)
RC-0084R Anti-Caspase-6 (NT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(N端)
RC-0052R Anti-Caspase-8 (pro Mch5)  半胱氨酸蛋白酶8抗体
RC-0049R Anti-Caspase-9  白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体
RC-0050R Anti-Caspase-9  白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体
RC-1165R Anti-β-catenin/β-cats  β-连环蛋白抗体
RC-0452R Anti-NAIF1 protein( CB12-327)  核凋亡诱导因子蛋白1
RC-1134R Anti-CBFA1/RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2)  成骨特异性转录因子抗体
RC-0764R Anti-CCK8(Cholecystokinin-8)  胆囊收缩素抗体/缩胆囊素抗体(八肽)

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