071409Rb，血红蛋白（HB）检测试剂盒（酶联免疫吸附试验法）

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

[预期应用]

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清 或其它相关生物液体中待检测指标含量。

[试剂盒内容]

[标本的采集与保存]

1、 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4^oC过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20^oC或-80^oC保存，但应避免反复冻融。

2、 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8^oC 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20^oC或-80^oC保存，但应避免反复冻融。

3、 组织匀浆：

1） 取适量组织块，于预冷PBS（0.02mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，称重后备用（组织块较大需先剪碎后再匀浆）；

2） 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10mL预冷PBS进行充分研磨，该过程需在冰上进行（有条件实验室可选用机器匀浆）；得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理（超声破碎过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复2次）。

3） 将制备好的匀浆液于5000×g离心5分钟，留取上清即可检测。

4、 细胞培养上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20^oC或-80^oC保存，但应避免反复冻融。

注意：

1、 以上标本均需密封保存，4^oC保存应小于1周，-20^oC不应超过1个月，-80^oC不应超过2个月。

2、 标本溶血会影响zui后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

3、 标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。[实验原理]

将待检测抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的待检测指标与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的待检测抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的待检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

 [实验流程]

1、实验前标准品、试剂及样本的准备；

2、加样（标准品及样本）100μL，37oC孵育2小时；

3、加检测溶液A100μL，37oC孵育1小时；

4、洗板3次；

5、加检测溶液B100μL，37oC孵育30分钟；

6、洗板5次；

7、加TMB底物90μL，37oC孵育15－25分钟；

8、加终止液50μL，立即450nm读数。

上海武昊公司郑重承诺：

售前：为您提供全面技术咨询服务并提供说明书，任何咨询都会细心答复，无论您是否购买。
售后：所有的elisa试剂盒如有质量问题，免费包换，为您提供免费代测服务，每个技术性的问题都会为您耐心解决。