徕卡TCS SP8 DLS 结合光片与共聚焦技术 Leica TCS SP8 DLS

将两种专用成像系统的优势合二为一：使用 Leica TCS SP8 DLS (数字光片)，您可在显微镜上使用柔和的单平面照明实现的共聚焦。通过研制出 TwinFlect 反光镜，我们就能将共聚焦平台 Leica TCS SP8 变为简单易用的多功能光片显微镜。

我们转向采用光片垂直布置设计。

黑腹果蝇眼睛绿色荧光蛋白表征 (3P3 催化剂) 的颜色编码三维图集。样品来源：Nadja Dinges，Roignant Lab，IMB Mainz。

扩展选件

● 通过单平面照明增强细胞活性

● 使用 sCMOS 摄像头观察快速实时过程

● 样品处理简单，可进行多位置实验

● 将共聚焦模式与光片显微镜技术相结合，拓展新应用领域

● 两侧同时照明，消除昏暗区域

● Leica TCS SP8 全系列始终能针对您的应用找到理想成像方法

● 将共聚焦平台变为光片显微镜。随时从 Leica TCS SP8 升级为 Leica TCS SP8 DLS

光片垂直布置—如何将光片技术引入共聚焦平台？

光片显微镜通常需要在独立系统中安装专用的光学装置，其中照明和检测物镜相互垂直布置。Leica TCS SP8 DLS 让光片显微镜变得非常的简便。的 TwinFlect 反光镜装置使照明光片偏转 90 度，从而将照明和检测光路集成到每台倒置 Leica TCS SP8 的纵向轴中，同时又不牺牲共聚焦功能。

执行和记录长期观察

成像需要光照，但光照过强会损伤细胞。光片显微镜是当今柔和的成像方案，它可减少光毒性和光漂白造成的总体光损伤。这会自动降低样品活性。在发育生物学中，柔和光片成像尤其有帮助：其光照强度低，摄取快速，以便长期观察果蝇胚胎等敏感性发育生物体，并以实时三维方式了解组织和器官的形成过程。

Low phototoxicity and specimen imaging in 3D: Development of Drosophila melanogaster over six hours. Probe: Light-sensitive RFP. 3D rendering. 150 µm z stack, 30sec/stack.

光片成像原理

光片显微镜对样品进行单平面照明，非常适合敏感样品和快速生物过程的成像。由于不存在离焦激发，可将光毒性的影响局限于焦平面上。这表示您还可自动获得光学切片，并在光片下移动样品，从而实现样品 3D 成像。

多色长期观察

斑马鱼体侧线 17 小时发育过程。样品来源：Darren Gilmour，EMBL Heidelberg (斑马鱼 36hpf，CldnB:lynGFP/CXCR4B:nucTomato)

高速成像：斑马鱼跳动的心脏，转基因株系 flik1::EGFP。在 xytz 录制之后进行后期摄取对齐。录制速度：120 帧/秒。来源：Emily Steed，Vermot Lab，IGBMC Strasbourg，France。

以的分辨率快速摄取图像

您是否需要以三维方式长期观察快速周期性生物过程？DLS 模块就是您的。发现斑马鱼心脏的律动之美。

使用 Leica TCS SP8 DLS，您可在两个的 sCMOS 摄像头之间任意选择，以出色的分辨率和高达 120 帧/秒的帧频进行快速图像摄取：pco.edge sCMOS 摄像头和 Hamamatsu 推出的 ORCA-flash 4.0 V2 摄像头均已集成在 LAS X LightSheet Wizard 中。

追踪快速的周期性运动

LAS X软件里新的 xytz 扫描模式可实现平面时间序列成像，并制成4D电影格式播放。该功能使得研究者可以追踪那些无法在传统Z轴堆积延时摄影模式下捕捉到的快速运动-比如斑马鱼心脏的跳动。

众多其他应用优势

我们的光片模块不仅仅作为共聚焦显微镜的功能性插件。Leica TCS SP8 和数字光片相辅相成，使您可随意扩展选件。您可在 LAS X 软件中方便地切换共聚焦和光片模式，使用共聚焦技术轻松操控样品。光转换或致伤实验乃至后续的柔和长期观察将变得十分简便。

组合成像模式：在 Kaede 斑马鱼尾巴上的光转换 (405 nm 激光) 和致伤 (多光子激光) 实验。移向伤口 (大片红色区域) 的光转换细胞 (小红点) 的延时录制。

被巨噬细胞愈合的伤口

4 日龄斑马鱼胚胎受伤后尾巴中的巨噬细胞 (mpeg1:Kaede)。样品来源：Francesca Peri，EMBL Heidelberg。

始终选用正确的激光

Leica TCS SP8 共聚焦显微镜的所有可见激光都可用于光片成像。白光激光在光片实验中提供较大的灵活性，以便选择正确的染料。在多色实验中，甚至可使用光谱相近的荧光基团。

熟悉的样品制备流程

Leica TCS SP8 DLS 采用垂直实验配置，样品制备流程与您原先熟悉的流程相近。样品封装在传统的玻璃底 Petri 培养皿中，可直接操作。您甚至还可在多个实验位置筛选多个样品：利用共聚焦载物台自动化技术在同一实验配置下实现多样品成像。的前提条件是：在样品两侧需要留出放置 TwinFlect 反光镜的空间。

Leica TCS SP8 DLS 的样品制备。样品包裹在玻璃底 Petri 培养皿的琼脂中。必须将多余的琼脂清除干净，以便为 TwinFlect 反光镜留出空间。

面向工作流的软件设计

LAS X 显微镜软件可逐步指导用户完成数据记录和评估。面向工作流的设计可帮助用户高效使用仪器。校准程序十分便捷，可精确创建光片。

样品两侧照明设计：两块 TwinFlect 反光镜相对放置，使它们均可被扫描器瞄准，从而消除昏暗区域。要在较大视场下获得清晰图像，可通过 LAS X 软件的 LightSheet Wizard 在线或离线融合选件将两幅图像融合在一起。

LAS X 软件还有许多附加软件包，您可根据自己的需求进行定制。LAS X 三维可视化模块可实现直观剪辑、快速渲染和立体显示，以新颖的方式交互处理三维数据。“拼贴图”实验可帮助您观察大片区域，而“标记和查找”实验可在多位置设置下观察多个相关区域。

优质的光学器件

适合各类应用的优质物镜是徕卡公司的标志之一。垂直布置光片系统的核心由物镜和 TwinFlect 反光镜装置构成。您可根据您的实验要求在两种照明物镜间任意选择 - Leica HC PL Fluotar 2.5x/0.07 和 Leica HCX PL FLUOTAR 5x/0.15，以此创建所需的光片。要展现最微小的细节或获取更大的视场，您可选择我们的检测物镜：Leica HC FLUOTAR L 25x/0.95 W 或 Leica HC APO L 10x/0.3 W 水浸物镜。

便捷的数据处理

长期 3D 观察过程会产生大量数据。LAS X 软件中集成了多种工具，可方便地管理这些数据。使用在线融合工具，您可选择保留原始数据，或仅保留融合图像以节省磁盘空间。摄取时将自动保存数据，而借助智能加载功能可方便地查看数据，直接访问大延时数据集中的特定时间点或相关 Z 轴堆栈。您可在管线中编译所需的后期处理步骤，它们将自动处理。

软件控制的气候室

软件控制的气候室可保持宜样品的环境条件。用户可使用 LAS X 环境控制模块实现对实验条件的全面控制。在实验过程中，可监控所记录的环境数据。您可在同一个界面设置所有环境条件，并运行温度曲线，例如，热冲击实验的温度曲线。