猪伪狂犬病毒IgG抗体检测试剂盒使用说明书

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   伪狂犬病是由伪狂犬病毒（PRV）引起的猪和多种动物共患的一种急性传染病。猪伪狂犬病主要引起仔猪的高死亡率和妊娠母猪的繁殖障碍，流行广泛，一旦传入猪群，将导致巨大经济损失，且很难*。
在猪的预防免疫工作中,zui值得关注的就是强化免疫的接种时机问题。在过高的抗体水平进行免疫,过高的抗体水平还会中和疫苗,影响疫苗的免疫效果,导致免疫失败；在较低的抗体水平进行免疫,又会出现抗体保护真空期,威胁猪的健康。该试剂盒检测反映抗体水平，利于指导免疫时机。
【使用意义】
接种猪伪狂犬疫苗后，并不能保证产生保护性抗体。由于多种因素可能导致猪不产生或产生低水平猪伪狂犬病毒抗体。通过使用本试剂，对免疫猪伪狂犬疫苗抗体动态水平进行监测，能快速准确的评价免疫程序，验证免疫效果；结合免疫后抗体变化特征，能快速选择*的第二次免疫时间，有效的制定和实施免疫计划。
【使用时间】
①猪伪狂犬病毒疫苗免疫后免疫效果监测
②平时的抗体监测
【检测原理】
包被经纯化的猪伪狂犬病毒，抗猪IgG抗体作为酶标记抗体，利用间接法来检测被检材料中是否含有猪伪狂犬病毒抗体。
【产品内容】
1.猪伪狂犬病毒抗原包被微孔板条：96Tx2
2.酶标记物：22ml×1
3.样品稀释液：20ml×1
4.显色剂A：12 ml×1
5.显色剂B：12 ml×1
6.洗涤液（用前1：25稀释）：25 ml×1
7.猪伪狂犬病毒抗体阳性对照血清：1.5 ml×1
8.猪伪狂犬病毒抗体阴性对照血清：1.5 ml×1
9.终止液：12 ml×1
10.封口膜：6张
11.密封袋：1个
12.说明书：1份
【操作步骤】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量包被微孔板条，设空白、阴性及阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对照血清100μl；样品孔每孔先加样品稀释液90μl，再加样品10ul（或样本1：10稀释后加100μl）；空白对照孔不加。
4.混匀，置37℃温浴30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置60秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。
7.置37℃温浴30分钟。
8.洗涤，同步骤5。
9.每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
10.每孔加终止液50μl，混匀，置酶标仪450nm处测各孔A值（建议用双波长450nm、630nm）。
【结果判定】
1.阴性对照：正常情况下，阴性对照孔A值≤0.1；
2.阳性对照：正常情况下，阳性对照孔A值≥0.4；
3.临界值（C.O.）的计算：临界值=0.15+阴性对照孔均值；所有阴性、阳性对照和样品的A值均须减去空白平均值后作为计算值；阴性对照孔A值大于0.10时应舍弃，如所有阴性对照孔A值都大于0.10时须重复实验；阴性对照孔低于0.05时以0.05计算。
4.结果判定：
检测标本A450值≥临界值判定为本试验阳性；检测标本A450值＜临界值判定为本试验阴性。
【注意事项】
1.操作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
2.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
3.样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。
4.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
5.所有样品洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
6.微孔板从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽后方可，未用完的微孔板须放入有干燥剂的密封袋中保存。
7.用于检测的样品应保持新鲜。
8.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
9.不同批号试剂组分不得混用。
【保存与有效期】
于2～8℃避光保存，有效期自成品检定合格之日起为12个月。【生产企业】 广州健仑生物科技有限公司

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