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肝吸虫病由肝吸虫(Clonorchis sinensis,C.s)寄生人体肝胆管所致,检测特异性肝吸虫抗体可作为肝吸虫感染的辅助诊断指标。
本试剂盒采用肝吸虫成虫抗原作固相抗原检测人及动物血清中的特异性肝吸虫抗体。本试剂灵敏度高,特异性强,重复性好,操作方便快速,可分多次使用。
●试剂组成
1.预包被板 48T/96T; 7. 终止液(6号液) 1支;
2.酶结合物(1号液) 1支; 8. 阳性对照品 1支;
3.洗涤液(2号液) 1支; 9. 阴性对照品 1支;
4.底物(3号液) 1支; 10.不干胶膜 1/2片;
5.显色剂(4号液) 1支; 11.自封袋 1个;
6.羊本稀释液(5号液) 1支; 12.使用说明书 1份;
●操作程序
1. 加样反应:每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔。样本检测孔每孔加羊本稀释液(5号液)1滴,再分别加入待检的血清样本50ul,混匀;阴性、阳性对照与待检样本同步处理,空白对照孔仅加入羊本稀释液(5号液)2滴。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,每孔加洗涤液(2号液)1滴,立即用蒸馏水注满,静置30秒后甩去,再直接用蒸馏水洗涤四次,每次均静置30秒后甩去,最后一次甩去拍干。
2. 加酶反应:除空白对照孔外其余每孔加酶结合物(1号液)2滴,37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,如上
洗涤,拍干。
3. 显色反应:加底物(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃下避光显色10分钟。加终止液(6号液)1
滴,混匀,终止反应(加终止液后蓝色会变为黄色)并判读结果。
●结果判断
以空白对照调零,用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度(A值)。当待检样本孔A值大于等于阴性对照A值的2.1倍者判为阳性。如阴性对照A值低于0.05时,按0.05计算。
●注意事项
1.试剂盒于2-8℃保存,每次使用前应先平衡至室温。
2.未使用完的板条应密封保存。
3.试剂盒中终止液具有腐蚀性,要小心使用。
4.瓶盖每次使用后要拧紧,各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。
5.试验样本应为无染菌、无血脂、无溶血的血清或血浆。任何样本都应视为传染源妥善处理。
6. 37℃孵育时,建议使用水浴箱。如无条件,可在温箱中放置湿盒进行反应并同时用不干胶膜封盖板孔。