从样本到结果：猪瘟PCR抗体检测仪的操作流程@2024全国包邮BK-PCR16D，山东博科仪器厂家持续更新中，非洲猪瘟(African Swine Fever, ASF)是一种对生猪养殖业造成严重威胁的病毒性疾病。为有效防控非洲猪瘟，快速且准确的诊断是关键。PCR抗体检测仪通过检测猪血清中的非洲猪瘟病毒抗体，能够在短时间内提供诊断结果。以下是从样本采集到结果报告的操作流程：

　　操作流程

　　样本采集

　　样本类型：通常采集疑似感染猪的血清样本。

　　采集方法：使用无菌注射器从猪的耳静脉或前腔静脉采集血液，血液在室温下静置1-2小时，待血清自然析出后，使用无菌技术分离血清。

　　样本标记：确保样本标识清晰，包括猪只编号、采集日期和采集人员等信息。

　　样本运输与保存

　　运输条件：样本应置于冷藏条件下(2-8℃)运输，以保持其稳定性。

　　保存条件：若无法立即检测，血清样本可在-20℃或-70℃低温冰箱中保存，避免反复冻融。

　　样本处理

　　试剂准备：按照PCR抗体检测试剂盒的说明书，准备所需的试剂，包括抗原包被板、标记抗体、底物等。

　　样本稀释：根据试剂盒说明，将血清样本进行适当稀释，通常为1:10或1:100。

　　加样

　　加样操作：将稀释后的血清样本加入预包被有非洲猪瘟病毒抗原的微孔板中，每孔加入50-100µL样本。

　　温育：将加样后的微孔板置于恒温振荡器中，37℃温育1小时，使抗体与抗原充分结合。

　　洗涤

　　洗涤步骤：使用洗涤缓冲液清洗微孔板3-5次，去除未结合的抗体和杂质。

　　加标记抗体

　　标记抗体：向微孔板中加入标记有荧光素的抗猪IgG抗体，37℃温育30-60分钟。

　　再次洗涤

　　洗涤步骤：再次使用洗涤缓冲液清洗微孔板，去除未结合的标记抗体。

　　加底物

　　底物：向微孔板中加入底物溶液(如TMB或OPD)，37℃避光温育10-15分钟，使结合的标记抗体显色。

　　终止反应

　　终止液：加入终止液(如硫酸)终止反应，使显色停止。

　　结果读取

　　仪器读取：使用荧光定量PCR检测仪读取荧光信号，仪器自动生成吸光度或荧光强度值。

　　结果分析

　　阈值判断：设定阈值，根据样本吸光度或荧光强度值与阈值的比较，判断样本是否为阳性。

　　结果报告：生成检测报告，注明样本编号、检测结果(阳性或阴性)、检测人员和检测日期等信息。

　　注意事项

　　无菌操作：整个操作过程需严格遵守无菌操作规范，避免污染。

　　试剂保存：试剂需在z定条件下保存，使用前检查有效期。

　　仪器校准：定期校准荧光定量PCR检测仪，确保检测结果的准确性。

　　通过以上操作流程，PCR抗体检测仪能够高效、准确地检测非洲猪瘟病毒抗体，为非洲猪瘟的防控提供科学依据。