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PN590012
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一、试剂盒特点
AP单克隆抗体特异地与AP结合,和其它结构相类似的化学物质不发生交叉反应。单克隆抗体质量稳定每批次见几乎没有变化。检测范围5μg/L-500μg/L(ppb)。通过固相萃取浓缩可以检测更低的浓度。这个试剂盒有很高的重复性,变异系数在10%之内。操作简单,整个过程仅花费2.5小时。试剂盒的形式是96孔微孔板,可以同时检测多个样品,花费合理。
二、检测原理(竞争ELISA)
1.竞争性反应
这个检测方法依靠单克隆抗体来识别AP。样品中的AP和一个AP-酶结合物预先混合然后加入到每个微孔中竞争包被在微孔表面的特异性抗体。样品中AP的浓度如果高于AP-酶结合物,AP将主要与抗体结合。反之样品中AP的浓度如果低于于AP-酶结合物,AP-酶结合物将主要与抗体结合。
2.显色反应
通过洗涤步骤去除没有反应的AP和过多的AP-酶结合物。通过加入底物来检测AP。和微孔板中抗体结合的AP-酶结合物催化底物发生反应产生有色物质。通过一个孵育期用稀酸终止反应。样品中AP的浓度越高导致结合到微孔板抗体上的AP-酶结合物越少,从而产生的颜色越淡,吸光度越低。
3.定量分析
利用已知浓度的AP标准的浓度和在450nm条件下获得的吸光度值做出一条剂量反应曲线(标准曲线)。把样品的吸光度值用内插法插入到标准曲线中可以精确的计算出样品中AP的浓度。