CHO细胞株的传代方法有哪些?
时间:2023-06-25 阅读:712
1.机械法
机械法是CHO细胞最早使用的传代方法,可采用开放式旋转培养瓶或滚筒式培养瓶进行传代。这种方法一般使用平滑的研磨器或压缩器,先将细胞切断,然后用PBS或其它体液冲洗,最后将细胞转移到新的培养瓶中继续生长。这种方法操作简单,效率高,但细胞的数量容易受到机械损伤的影响。
2.酶消化法
酶消化法在机械法的基础上发展而来,采用胰酶等酶类来消化细胞,可以降低细胞损伤,使得细胞转移更加稳定。先用PBS防止细胞损伤,然后加入胰酶等酶类,将细胞消化,最后将被消化的细胞转移到新的培养瓶中培育。这种方法无需使用研磨器或压缩器就能快速分离细胞,传代效率也很高。
3.缩减法
缩减法是一种时间较短、效率较高的CHO细胞传代方法,其步骤是:将旧的细胞培养基全部或部分抽取,加入和新生长培养基相同的成分,再加入较小的细胞数量,继续培养生长。这种方法减少了细胞之间的接触,防止了细胞的受空气的影响。
4.压力法
压力法是在缩减法的基础上发展而来的,采用了压力方式来让细胞实现传代,这种方法又叫压力透析法。适当调整细胞密度,把细胞装入滤膜中,然后施加合适的、足够的水压,让细胞穿过滤膜,在新的培养基中继续生长。这种方法操作简单,效率高。