高压蒸气灭菌器使物品灭菌后达到无菌要求，这是药品实验的基本保证。高压灭菌器灭菌效果是否合格是实验成败的基础最关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解，不需高压灭菌外，大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不成功，直接关系到对药品的无菌试验结果。因此必须认真对高压灭菌器进行灭菌效果的验证。为此我们提供了进行灭菌效果验证的一个简易可行的方法。

高压蒸汽灭菌锅验证-消毒灭菌效果验证  试验材料

生物指示剂：菌片和培养基混合指示管采用嗜热脂肪杆菌芽孢（ATCC 7953常用的生物指示菌）和溴甲酚紫蛋白胨恢复培养基组成，根据培养后的颜色变化来判断压力蒸汽灭菌是否合格。本品芽孢含量为5.0×10^5cfu/支～5.0×10^6cfu/支，121℃压力蒸汽灭菌死亡时间不超过19分钟，存活时间不少于3.9分钟。

适用于121℃下排气压力蒸汽和132℃预真空压力蒸汽灭菌效果测试。

检测方法

1 在压力蒸汽灭菌生物指示剂表面的标签空白处，记录灭菌管理的必要事项（如：灭菌处理日期、操作人员等）

2 将压力蒸汽灭菌生物指示剂置于标准试验包（23cmX23cmX15cm）的中心部分，然后将标准测试包置于灭菌器排气口的上方或生产厂家建议的灭菌器内Γ难灭菌的位置，运行灭菌程序。

3 灭菌处理后，将标准测试包中的生物指示剂取出，确认标签上的化学指示油墨由黄色变成黑色后，放置15min以上冷却至室温。

4 用夹子将冷却后的压力蒸汽灭菌生物指示剂内部的安瓿瓶夹破，使菌片充分接触培养基，确认菌片浸于培养基后及时培养。

5 请在56~58℃进行培养。另取一支同一批次未灭菌的压力蒸汽灭菌生物指示剂，在夹破安瓿瓶后，同条件下进行培养作为阳性对照。

6 确认灭菌效果后，请将标签取下粘贴在记录簿留存。

【结果判定】

1、若恢复培养48H后，恢复培养基由紫红色变成黄色，表示灭菌不合格。

2、若恢复培养48h后，恢复培养基的颜色保持紫红色不变，则判断灭菌合格。

3、以上两种结果只有在对照管（培养不超过24小时）为阳性时其生物监测结果才算有效。