转染都有哪些途径可以实现?
时间:2023-02-27 阅读:2857
超声波与电磁波相似,可被反射、折射和聚焦,其不同之处在于:者传播时需要弹性介质,而后者则可在真空中自由传播。在固体介质中超声波的纵向波和横向波均可传播,而在气体和液体介质中只有纵向波可传播。纺织品染整加工一般为液液、液固相体系,因此对超声波纵向波的研究更为重要。
转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术,它是研究基因表达调控,突变分析等的常规工具。细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上。稳定转染是指DNA整合到宿主细胞的染色体中。
转染途径:
1.电穿孔法:
电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。本法需用特殊设置(电穿孔仪),把悬浮状态的受体细胞和供体DNA共同放入皿中(或杯中),再施以高压电脉冲,能够促进DNA通过细胞膜而进入胞内,并可整合到细胞的DNA中,使细胞发生转化。若转移的DNA为带有选择标记基因的质粒,也可在选择培养基中进行鉴定。
2.显微注射
本法是借助显微注射器直接把DNA注射入核内,使之发生整合入受体细胞基因组中的技术。本技术需要有严密无菌的净化室,以免敞开操作污染,同时要能有自动拉针仪以制备显微针,一般用手动拉针器拉制时要能使针末端有一个0.6cm长的细部,太长易折断,针尖开口为2-3μm间,针口小于1μm更佳,针尖开口大于5μm易刺伤细胞。
3.基因枪
基因枪依靠携带了核酸的高速粒子而将核酸导入细胞内。可以将大分子导入细胞。