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双层实验的双层探头必须在大输入电容负载下保持稳定。Axopatch 200B 是坚如磐石的,输入电容为 1000 pF。此外,Axopatch 200B 中的集成技术使双层电压能够非常快速地步进。有两个原因。首先,积分器具有固有的大动态范围,允许它瞬时通过几微安的电流。其次,在大指令电压阶跃期间,积分器进入复位状态。在这种状态下,探头继续作为电压钳放大器工作,但反馈电阻非常低。在积分器处于复位状态的几毫秒内,它可以通过高达 1 mA 的电流为双层电容快速充电。
电阻式探头模式
在全细胞记录中,细胞和环境产生的电流噪声比膜片钳放大器产生的电流更大。因此,低噪声电容反馈探头的优势无法在全细胞模式下得到有效利用。出于这个原因,Axopatch 200B 使用传统的电阻反馈探头电子设备进行膜片钳记录的全细胞模式。CV 203BU 探头包括两个反馈电阻器,可在全电池模式下提供广泛的电流通过能力。500 兆欧反馈电阻 (ß=1) 提供低噪声和大电流通过能力 (20 nA)。对于更大的电流,可以切换到 50 兆欧反馈电阻器 (ß=0.1) 以传递高达 200 nA 的电流。
串联电阻补偿 串联电阻补偿
有两个目标,预测和校正。
串联电阻预测
通过瞬时增加指令电压阶跃的大小(“增压”),使膜电位尽可能快地达到其值。
串联电阻校正
为了消除由于电极上的电压降引起的误差并提高记录的带宽,通过将与测量电流成比例的信号添加到探头的命令输入来应用正反馈以增加命令电位。串联电阻预测和校正可在 Axopatch 200B 上一起或单独使用。
双速电流钳
Axopatch 200B 采用双速电流钳来优化速度和稳定性。速度的选择取决于移液器的阻力。对于超过 10 兆欧的移液器电阻,可以使用 I-Clamp FAST 模式在许多实验条件下获得 10 µs 的上升时间。I-Clamp NORMAL 模式可确保任何超过 1 兆欧的移液器电阻的稳定性。此外,可以使用电流钳到零电流(I=0 模式),以及较慢的钳到零电流(跟踪模式),用于在密封形成之前接近细胞时跟踪移液器偏移的缓慢变化。此外,Axopatch 200B 包括在电流钳中的串联电阻补偿,允许校正由于移液器电阻引起的电压误差。
Axopatch 200B 提供低噪声的膜片钳放大器技术。贴片模式下的开路(放大器)噪声已降至低水平:1 kHz 带宽以下 < 15 femtoAmps (rms)、5 kHz 带宽以下 < 60 femtoAmps (rms) 和 10 以下 < 130 femtoAmps (rms) kHz 带宽,均使用 8 极贝塞尔滤波器测量。安装了移液器支架后,噪音仍然很低(10 kHz 带宽以下 145 femtoAmps rms)。这意味着在实际录音过程中噪音更低;这种噪声性能部分是通过将探头内部的输入场效应晶体管冷却到远低于 0°C 来实现的。
更好的噪音性能只是故事的一部分。重新设计的超薄探头通过使其更容易安装在显微镜下,改善了电极对准备工作的访问。我们现在在一个探头中包含两个全细胞范围(以前仅在两个单独的探头中可用)。
Axopatch 200B 随附以下物品:
Axopatch 200B 放大器
CV-203BU 探头(部件号 1-CV 203BU)
美国电源线(部件号 1-3010-0011)
欧洲电源线,CEE7/7(部件号 1-3010-0013)
附件套件(部件号 1-2050-0301)包含:ACC 保险丝(部件号 1-2050-0014)、用于将探头连接到机械手的底板(部件号 1-5200-0100)、电极支架(部件号 1-HL-U )、串联电阻抖动盒(部件号 1-DR-1)、Patch-1U 型号单元(部件号 1-PATCH-1U)、手册(部件号 1-2500-0121)
移液器偏移
Axopatch 200B 提供 ±250 mV 的偏移电位。
密封测试
方便的密封测试可用于电压钳模式(5 mV 脉冲)或电流钳模式(50 pA (ß=1) 或 500 pA (ß=0.1))。
双指令电位
两个独立的指令电位输入允许您将来自两个不同来源的指令输入信号相加。后面板命令被缩放以提供更大的范围(高达±1V),因此对于电化学测量非常有用。
保持命令
Axopatch 200B 的保持命令比其前代产品有所增强,增加了一个 X1 和 X5 开关,允许您选择 0 – 200 mV 或 0 -1 V 范围。当使用来自计算机的外部命令来建立保持电位时,ON/OFF 开关可以禁用此控制。
移液器电容补偿
在电压钳或电流钳模式下操作时,控制两个时间常数 Fast 和 Slow 的幅度和 tau。
Cell Capacitance Compensation
补偿高达 100 pF (ß=1) 或 1000 pF (ß=0.1) 以允许从大范围的单元尺寸进行记录。
输出增益
可以选择跨越 1000 倍范围的十个增益设置,以将输出缩放到水平。
泄漏减法
Axopatch 200B 允许您纠正出现的泄漏错误,而无需调整数据采集软件设置。
低通
滤波器 具有从 1 kHz 到 100kHz 的五种设置的 4 极贝塞尔滤波器允许您在比以前可用的两倍范围内设置适合您应用的带通。
面板仪表
报告任何操作模式下的电流、电压或探头温度值。报告稳态电流以监测电压钳输出。为了评估噪声,电流显示为 RMS 值。
Zap
Axopatch 200B 通过在选定的持续时间内施加单个 +1.3V 脉冲来促进贴片破裂。
移液器支架
提供两个不同长度的 HL-U 支架,可容纳 1.0 毫米至 1.7 毫米外径的移液器。