纯化小技巧 | “蓝胶”用得好，纯化没烦恼
时间：2023-10-12 阅读：2792
Blue 系列的层析介质通常也被大家亲切称为“蓝胶”，它是将Cibacron Blue共价连接到高度交联琼脂糖基架上而制成的亲和层析介质。
蓝色染料Cibacron Blue可与多种蛋白质结合，如白蛋白、脂蛋白、干扰素、凝血因子；也可与多种酶结合，如激酶、脱氢酶和大多数需要含腺苷辅因子的酶(如NAD+)。
Blue Chromstar FF，MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)主要应用于白蛋白和干扰素的大规模纯化，酶的分离纯化，白蛋白的去除等方面。
参数介绍
*结合载量的测量条件：层析柱：4.7ml预装柱；平衡缓冲液：20 mM 柠檬酸, pH 5.5；洗脱缓冲液：50mM磷酸钠，2M氯化钠，pH 7；将过量的人血清白蛋白上样至层析柱，测量人血清白蛋白10%穿透时的动态结合载量(QB10)。
**层析介质在40℃，pH3-13 环境下放置7 天后，其理化性质和功能没有明显变化。
***v/v，体积比。
性能表现--载量和回收率
采用人血清白蛋白作为样品，对Blue Chromstar FF，MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)的DBC(动态结合载量)进行比较。
实验条件如下：
层析柱：4.7 ml预装柱，装柱高度10 cm，柱体积约4.7 ml
样品：人血清白蛋白(HSA), 1 mg/mL
平衡缓冲液：20 mM 柠檬酸, pH 5.5
洗脱缓冲液：50mM磷酸钠，2M氯化钠，pH 7
流速：151 cm/h
保留时间：5 min
图1结合洗脱图谱【以MaXtar Blue (HS)为例】
表1 Blue Chromstar FF，MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)在QB10的动态结合力
百林科可以提供包括Blue Chromstar FF，MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)在内的，不同基架、配基密度、结合载量的“蓝胶”，以期为更多用户的研发生产提供多样化选择。
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