蛋白层析用于分离纯化大量生产的蛋白质
时间：2023-09-21 阅读：716
蛋白层析是生物制药领域中一种非常重要的分离和纯化技术。它能够通过利用分子之间的相互作用来对蛋白质进行分离，并最终得到高纯度的目标蛋白。原理是利用静电吸附、亲和性、凝胶过滤、尺寸排除等不同的基础分离原理，将混合物中的目标蛋白与其他杂质分离开来，并通过逐步改变流动相（溶液），使得目标蛋白质逐渐从固定相上洗脱出来。
根据原理的不同，蛋白层析可以分为以下几种不同的方法：
1.静电吸附层析：基于静电吸附作用，将带有相反电荷的蛋白质与固定相上的离子基团吸附在一起。可以通过调整流动相的pH值、离子强度和离子类型来改变分子间的静电相互作用力，从而实现分离纯化目标蛋白。
2.亲和层析：利用目标蛋白与固定相上特定（如化合物、抗体、金属离子等）结合的亲和反应进行分离。在条件变化后将目标蛋白从固定相上解离下来的过程，叫做洗脱。
3.凝胶过滤层析：利用孔径大小不同的凝胶进一步分离蛋白。凝胶是一种多孔的高分子材料，通过分子筛选的方式，将分子尺寸大的分子限制在凝胶内部，而较小的分子则能够自由地穿过凝胶结构。
4.尺寸排除层析：利用凝胶酸化具有离子交换能力，并根据蛋白质的空间构型来进行分离。由于分子构型的影响，分子废液会被过滤掉，而目标蛋白则能够与溶剂分离出来。
蛋白层析在生物制药领域中广泛应用，常用于分离纯化大量生产的蛋白质。它可以将生物合成的蛋白混合液中的高含量目标蛋白质与其他杂质分离开来，并最终得到高纯度的目标蛋白。还可用于药物筛选（如筛选药物和物质相互作用的基础），以及酶的纯化和结构分析。因此，它也被广泛用于生物医学研究、分子生物学研究和生物技术研究领域。