产品简介

PikoGreen是一种极为灵敏的双链DNA荧光染料，于双链DNA的定量。测定DNA浓度在cDNA文库构建、DNA亚克隆、PCR产物估测等领域中非常重要，另外疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测因关系人身健康，显得尤为重要。PikoGreen dsDNA定量试剂盒（Broad Range）是李记生物研发的dsDNA定量试剂盒，具有线性dsDNA特异性好、线性范围宽、操作简便等特点。

产品详情

PikoGreen dsDNA定量试剂盒(Broad Range)

产品描述

PikoGreen是一种极为灵敏的双链DNA荧光染料，于双链DNA的定量。测定DNA浓度在cDNA文库构建、DNA亚克隆、PCR产物估测等领域中非常重要，另外疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测因关系人身健康，显得尤为重要。

相比传统的方法，Pikogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势：①灵敏：数量级较UV吸光读数更敏感，可节省样品；②特异性强：只结合dsDNA，特异性强，不受样品常规污染影响。传统紫外吸光法容易受样品中存在的单链DNA，蛋白，RNA等影响；③耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、CHCl₃、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。④线性范围宽：PikoGreen dsDNA染料测定DNA浓度，在100pg/ml-100ng/ml范围内呈良好线性；荧光计兼容。⑤容易使用：在样品中加入染料，等待5-6分钟染色，然后读数即可，且适用于96和384孔板；与大多数基于荧光的酶标仪和可适用于各种DNA样品分析，PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

PikoGreen仅与DNA双链结合后才发出荧光，且所产生的荧光与DNA浓度呈正比，在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在四个数量级范围内呈线性，且几乎无序列依赖性，可以精确地测量多个来源的DNA，包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。该方法因其稳定性、灵敏性，已经录入《中国药典》。

PikoGreen dsDNA定量试剂盒(Broad Range)（兼容Qubit 3.0）是李记生物研发的dsDNA定量试剂盒，具有线性dsDNA特异性好、线性范围宽、操作简便等特点。

产品组分

PikoGreen dsDNA 定量试剂盒组份（1000 assay）

              A：1×定量缓冲液      250 mL

              B：100×反应液          2.5 mL

              C：100×反应增强液   2.5 mL

              D：dsDNA 标准品    9 x 0.5 mL（0 , 2, 6.25, 12.5 , 25, 50 , 100, 150 and 200 ng/uL）

技术资料

1. Ex(nm)：350

2. Em(nm)：460

运输与保存方法

冰袋运输。收到货后-4℃避光干燥保存。如果较长时间不用，建议把TE缓冲液及dsDNA标准品放置于-20℃保存。

使用方法：（以96孔板为例）

1．使用前，将产品从储存条件下取出恢复至室温。PikoGreen提供的是DMSO溶液，在4℃存放时成固体，可37℃水浴溶解。每个组分应充分震荡或涡旋混匀、离心，以免造成不必要的试剂损耗。

2．配制PikoGreen工作液，分别吸取20ml组分A, 200uL组分B, 200uL组分C配制成20ml 1 x Piko Green工作液。新配工作液应在1小时内使用，工作液重新存放使用时须重悬，以免染料沉淀，工作液存放24小时，会轻微影响定量结果。

3．每个样品，吸取200uL的工作液至黑色的96孔板微孔中。为确保结果精确可靠，建议每个测试样品和DNA标样分别做平行的3个复孔。黑色的检测板可以减少各测试样品间的荧光干扰。

4．96孔板微孔中，分别加入dsDNA标样或待测样品各10 uL，并用移液器轻轻混匀。

5．将微孔板室温避光孵育10分钟，在Ex(nm)：350,  Em(nm)：460处用酶标仪测量荧光值。

6．制作标准曲线，计算样品浓度。

注意：

1．为了得到*结果，请使用精确校准的移液器和去RNA酶的枪头、试管以及检测板。

2．建议检测时每个DNA标样和未知样品都设定3个复孔。如果检测时不只一块96孔板，建议每块96孔板都设定一条标准曲线，尽量减少检测板之间的误差。

3．为得到*结果，检测板应在一小时内读取完毕。如果将反应液重新储存并在24小时内读取数据，结果的精确性会有轻微损失。

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