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发挥重要作用 上海卢湘仪离心机为提取SOD增添动力

来源:中国制药网
2016/12/22 17:04:5644229
  【中国制药网 企业新闻】在“十三五”初期,我国医药工业经济规模保持稳步辅仁发展,主营业务收入和利润总额持续增长。中国医药工业信息中心咨询总监兼咨询师卢敏丽表示,2017年,我国医药工业将完成更有质量的成长。

  医药工业的良好发展态势助推着制药机械行业稳步前行。当下的制药机械行业,设备占据市场主流,掌握核心技术成为药机企业制胜的关键。离心机作为制药机械行业的“宠儿”,在技术浪潮中劈波斩浪,抢占市场制高点。

  离心机是利用离心力分离液体与固体颗粒,或分离液体与液体的混合物中各组分的机械。离心机应用范围广,主要适用于化工、石油、食品、制药等行业。作为我国一家获得美国FDA认证的离心机企业,上海卢湘仪离心机仪器有限公司(以下简称“上海卢湘仪”)通过不断地研发创新,以精良的设备、稳定的性能、新颖的设计赢得了国内外客户的肯定和青睐。

  近日,上海某制药厂在用猪血提取超氧化物歧化酶的实验中就使用到了上海卢湘仪的DL-8M大容量冷冻离心机。药厂负责人对实验结果表示满意,并对上海卢湘仪的产品及服务给予了肯定。

(操作人员进行提取超氧化物歧化酶实验)

  提取SOD实验原理分析

  超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,以下简称“SOD”)是一种能专一地清除超氧离子自由基的金属酶。它具有抗衰老、抗辐射、抗炎及抗癌等作用,故在医药、化妆品及食品工业等方面有较为广泛的应用前景。

  实验结合了物质的性质,运用了两个原理。一个是用有机溶剂沉淀法分离纯化蛋白质,即用有机溶剂沉淀法以新鲜猪血为原料,从中提取SOD并进行分离纯化。和个远离相比,第二个则相对复杂。

  SOD是一种酸性蛋白,对热、pH和蛋白酶的水解比较稳定。按照它所含金属离子的不同,可分为Cu-Zn-SOD(二聚体,蓝绿色)、Mn-SOD(紫红色)和Fe-SOD(黄褐色)三种。机体内的过量和不足都讲产生不利的影响。SOD对过量的的及时清除保证了机体内的含量相对的平衡。

  而机体内的形成则可分为生理性和病理性两方面。在一些正常的生理过程中形成一些O2-。例如:呼吸链中电子传递结果可以产生一些O2-。在某些疾病的过程产生大量O2-,如不及时清理,将会对细胞产生损伤。SOD将O2-,歧化为H2O2,而过氧化酶、股胖肝泰过氧化酶可以催化分解,在集体内形成一套解毒系统,从而起到防护作用。

(成功提取超氧化物歧化酶)

  成功提取SOD 上海卢湘仪离心机贯穿实验主线

  在提取SOD的过程中,卢湘仪离心机起到了至关重要的作用,为实验的顺利进行助有一臂之力。

  首先取新鲜猪血200ml于500ml的离心管中,配置6000r/min的速率,用10分钟离心去掉上层血浆。取下层红血球粘稠液后加入2倍体积的0.9%NaCl溶液进行清洗。再配置同样的速率和时间进行离心,舍弃上层清液后,再加入2倍体积的0.9%NaCl溶液重复清洗一次。以相同的速率和时间得到洗净的红血球粘稠液。

  其次,向洗净的红血球中加入等体积的蒸馏水,剧烈搅拌30分钟过后,使其充分溶血。再向溶血液中缓慢加入预冷的0.25倍体积的95%乙醇溶液和0.15倍体积的氯仿。可以看到匀浆逐渐呈现出暗红色,然后再继续搅拌15分钟。配置4000r/min的速率和10分钟加以离心,此时将去掉变性蛋白沉淀物,得到上层液,留样500ul。

  这个时候将清液放在65-70℃恒温水浴中进行热处理,15分钟后取出,再迅速冷却到室温。然后再配置4000r/min的速率,用5分钟进行离心从而除去沉淀。这个步骤可以得到浅黄色的粗酶液,留样500ul。

  实验的后,需向粗酶液中加入等体积的丙酮溶液,在冰箱中静置过夜,配置6000r/min的速率,10分钟离心后舍弃上清液,得到终沉淀。此时,将沉淀物用等体积预冷的丙酮溶液清洗两次,在进行离心并收集沉淀,自然干燥后即可得到淡绿色成品,再溶于30ml蒸馏水中以备用。

  本次实验成果显著,药厂负责人在实验结束后表示,将与上海卢湘仪保持长期的合作关系。上海卢湘仪总经理李桂梅也表达了继续合作的意愿。李桂梅称,药厂对卢湘仪产品使用的满意就是对企业的支持和信任,上海卢湘仪将为其提供的的服务和产品,同时也将为国内制药行业的发展贡献一份绵薄之力。

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