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异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 IPTG

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2300 ≥1Kg

具体成交价以合同协议为准

怀化市

湖南汇百益新材料有限公司

产品型号:     厂商性质:生产厂家
湖南省怀化市洪江区工业园8号
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产品简介

异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 IPTG常用于需要诱导 β-半乳糖苷酶活性的克隆实验。它常与 X-Gal 或 Bluo-Gal 结合使用,用于重组细菌菌落的蓝白筛选,这些菌落可以诱导 lac 操纵子在大肠杆菌中的表达。IPTG 与 lacI 阻遏蛋白结合并改变其构象而发挥作用,防止 β-半乳糖苷酶编码基因 lacZ 的抑制。

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丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 IPTG常用于需要诱导 β-半乳糖苷酶活性的克隆实验。它常与 X-Gal 或 Bluo-Gal 结合使用,用于重组细菌菌落的蓝白筛选,这些菌落可以诱导 lac 操纵子在大肠杆菌中的表达。异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 IPTG 与 lacI 阻遏蛋白结合并改变其构象而发挥作用,防止 β-半乳糖苷酶编码基因 lacZ 的抑制。

诱导原理:

(1)在原核蛋白表达体系中,如 E.coli的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、渗透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调控基因I。I基因编码一种阻遏蛋白(Lac阻遏物,不属于乳糖操纵子),后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状态。在启动序列P上游还有一个分解(代谢)物基因激活蛋白(CAP)结合位点。由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达 。

(2)Lac 阻遏物是一种具有 4 个相同亚基的四级结构蛋白,都有一个与诱导剂结合的位点。 在没有乳糖存在时,Lac操纵子(元)处于阻遏状态。此时,I序列在PI启动序列操纵下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结合,抑制转录启动。当有乳糖存在时,Lac操纵子(元)即可被诱导。在这个操纵子(元)体系中,真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞,经β-半乳糖苷酶催化,转变为半乳糖——即生理上的诱导剂。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导致阻遏蛋白与O序列解离、RNA 聚合酶不再受阻碍,启动子P 开始发生转录,启动反应开始发生转录。



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